多项选择题

同学使用T4DNA连接酶将目的片段连接于载体上总是失败,可能原因有哪些()

A.连接Buffer中ATP失效
B.未使用同种酶对载体和目的片段处理
C.反应过程中未添加Mg2+
D.在PH为7.6的环境中进行