下列哪一个不是PCR必须的条件？（）

A.引物需要特异性好，而且决定了扩增片段的长短
B.引物长度一般18-30bp
C.引物GC比例含量需要控制在合理范围内
D.上下游引物的Tm 值尽量保持不同

A.变性、延伸、退火
B.变性、退火、延伸
C.退火、延伸、变性
D.退火、变性、延伸

A.RT-PCR
B.qPCR
C.ddPCR
D.illumina测序技术