引物的Tm值主要取决于它的（）

A.可以分为直接检测法和间接检测法
B.直接法主要用于酶或荧光素直接标记的核酸探针的信号检测
C.生物素或地高辛标记的核酸探针必须通过耦联和显色两步反应才能完成检测
D.耦联反应可分为直接法、直接亲合法、间接免疫法、间接亲合法和间接免疫亲和法等几类
E.化学发光检测法中应用最为广泛的是碱性磷酸酶催化鲁米诺伴随的发光反应

A.生物素
B.地高辛
C.酶
D.荧光素
E.金、银

A.32P的放射性最强，灵敏性高；缺点是半衰期短，分辨率相对较低
B.3H的优点是射线散射少，分辨率较高；半衰期最长，标记的探针可长时间反复使用，但对环境的潜在危害较大；灵敏性较低
C.35S的半衰期短，放射性较强，散射作用介于两者之间
D.35S适用于核酸序列分析和原位杂交等实验
E.3H特别适合于基因组中单拷贝基因和低丰度基因的检测